Mise au point en 1985, cette technique a connu le développement
le plus rapide et le plus spectaculaire de la biologie.
Le principe
La PCR permet d'amplifier une séquence
désirée par réplications successives.
Il suffit pour cela de choisir des amorces oligonucléotidiques
synthétiques capables de s'hybrider à ses bornes
et de réaliser les réplications qui assureront
la multiplication de la séquence encadrée par
les amorces.
Chaque cycle (dénaturation 95°C,
hybridation 40 à 70°C, élongation 72°C)
permet de doubler une séquence d'ADN. On atteint un
maximum d'amplification après une vingtaine de cycles.On
utilise une ADNpolymérase extraite d'une bactéries
(Thermus aquaticus) vivant dans les sources chaudes;
la Taqpolymérase thermostable qui ne subit pas de dénaturation
lorsque le mélange est porté à 95°C.
|